La esclerosis lateral amiotrófica (ELA) es un trastorno neurodegenerativo en el que la unión neuromuscular se degenera progresivamente, provocando dificultades de movimiento, parálisis y, finalmente, la muerte. A menudo, los hallazgos preclínicos finalizan prematuramente, ya que la evaluación de posibles compuestos terapéuticos se centra en un único estudio o en un único modelo animal. En este trabajo, se seleccionaron 3,765 nuevas pequeñas moléculas derivadas de la Pimozida, una droga con potencial reposicionamiento neuroléptico para ELA, en Caenorhabditis elegans. TRVA242 se identificó como el compuesto más potente, ya que mejoró significativamente la eficiencia del rescate de déficit sináptico en la unión neuromuscular y locomotora en el modelo C. elegans TDP-43.
Materiales y Métodos
C.elegans transgénicos mTDP-43 sincronizados en estadio adulto joven se colocaron en placa de 96 pocillos con solución M9 (20 μl por pocillo, aproximadamente 60 gusanos por pocillo), conteniendo DMSO o el compuestos de prueba. La actividad natatoria de los nematodos se registró en el sistema WMicrotracker. Los experimentos se realizaron por triplicado. Todos los compuestos que actuaron positivamente se volvieron a analizar. Los experimentos se realizaron a 20°C. El análisis se realizó empleando two-way ANOVA con análisis post hoc de comparación múltiple (GraphPad Prism).
Resultados
La Figura 1A muestra los resultados de la búsqueda inicial de compuestos en C.elegans. Específicamente, se realizó una búsqueda masiva de 3.768 compuestos utilizando una cepa transgénica de C. elegans que expresa un TDP-43 mutante de humano (TARDBPA315T, denominado en este documento mTDP-43). Esta cepa transgénica presenta defectos de motilidad dependientes de la edad que conducen a fenotipos de parálisis en cuestión de horas cuando se cultivan en medio líquido. De las moléculas candidatas, se lograron identificaron 11 compuestos que resultaron en una mejora en la motilidad en los gusanos mTDP-43 cuando se probaron durante 6 h a una concentración de 20 μM. TRVA242 resulto ser el compuesto con mayor potencial de reversión del fenotipo deficiente de actividad natatoria en el modelo transgénico mTDP-43 de C.elegans.
Neurotherapeutics . 2019 Oct;16(4):1149-1166. doi: 10.1007/s13311-019-00765-w.
Bose P, Tremblay E, Maois C, Narasimhan V, Armstrong GAB, Liao M, Parker JA, Robitaille R, Wen XY, Barden C, Drapeau P.