El comportamiento animal está dado por múltiples mecanismos de señalización y respuesta. En ellos, son importantes los procesos de síntesis y liberación de pequeñas moléculas, así como también la integridad celular y las complejas interacciones que ocurren en el organismo. Este conjunto de procesos integrados, puede verse afectado por un amplio espectro de sustancias químicas. Si las mismas propiciaran un efecto dañino/alteración sobre un ser vivo, serían consideradas tóxicas.
El comportamiento locomotor (movimiento) del pequeño nematodo de vida libre C.elegans, ha demostrado ser útil en la evaluación de toxicidad. Muchos reportes bibliográficos evidencian su implementación en diversas áreas de estudio, por ejemplo, en Ecología, Farmacología, Nanotecnología, Agroquímica Y muchas otras.
Nuestra tecnología de registro de actividad “WMicrotracker” permite realizar monitoreos de toxicidad en pequeños organismos multicelulares de manera fácil, rápida y económica. A continuación se ejemplifica el procedimiento a modo ilustrativo:
Medición del efecto de la concentración de KCl
En este experimento podemos observar el efecto de concentraciones crecientes de KCl en animales jóvenes adultos de la cepa N2 de C.elegans. El registro de 12 horas de actividad muestra un efecto inmediato de la sal sobre el comportamiento locomotor del animal. Se observa un efecto deletéreo en dosis superiores a 3,75 g / l. La muestra control hace referencia a nematodos en solución tampón K (KCl 32 mM, NaCl 51 mM, Ref: Williams P).
Metodología:
(1) Obtener poblaciones sincronizadas de gusanos en estadío jóvenes adulto en placas de NGM (2) Lavar los gusanos de las placas utilizando solución tampón K. (3) Realizar el recuento de gusanos en 10ul de medio, y ajustar el volumen para obtener [5 gusanos / 10ul]. (4) Transferir con una pipeta multicanal, 90 μl de la solución con gusanos a cada pocillo de la placa de 96 pocillos fondo plano. (Opcional/Recomendado:) Dejar reposar durante 1h y medir la actividad basal usando WMicrotracker. (5) Añadir a cada pocillo 10 μl de los químicos a testear a una concentración 10X (En el volumen final de 100 ul, la concentración será 1X). (6) Registrar la actividad de la placa en el sistema WMicrotracker.